ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中
現(xiàn)代的科學(xué)技術(shù)是日新月異的,試驗(yàn)試劑產(chǎn)品也都在不斷的優(yōu)化和改善。ELISA試劑盒使用抗原抗體之間專一性結(jié)合的特性,對(duì)樣本進(jìn)行檢測(cè)的試驗(yàn)辦法,經(jīng)過(guò)底物顯色深淺代表待測(cè)物在樣本中含量的多少。
ELISA試劑盒操作步驟:
1、加標(biāo)準(zhǔn)品:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔,依次加入不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50ul(建議每個(gè)濃度做2個(gè)平行孔)。
2、加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品40μl,然后再加樣品親和素10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3、溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4、配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6、加酶:除空白孔外每孔加入酶標(biāo)試劑50μl。
ELISA試劑盒在根底中具有的特性:
1、水溶性、低黏度、無(wú)腐蝕、不易燃、不污染環(huán)境。
2、所采用的辦法特異性好,活絡(luò)度、準(zhǔn)確度、精密度。
3、所用規(guī)范品或規(guī)范參閱物契合推薦規(guī)范和要求。
4、貯存期至少為1年。
用途:
1、其抗原抗體反響具有高度的特異性。
2、將酶催化反響的擴(kuò)大效果和抗原抗體親和反響的高度專一性、特異性相結(jié)合,以酶標(biāo)記的抗原或抗體作為首要試劑進(jìn)行免疫測(cè)試,所以具有很高的活絡(luò)度。
3、完成了在細(xì)胞或亞細(xì)胞水平上示蹤抗原或抗體的地點(diǎn)部位,或在微克、乃至納克水平上對(duì)其進(jìn)行定量。